M16-Type Metallopeptidases Are Involved in Virulence for Invasiveness and Diffusion of Leptospira interrogans and Transmission of Leptospirosis.

BACKGROUND: Leptospirosis is a global zoonotic infectious disease caused by Leptospira interrogans. The pathogen rapidly invades into hosts and diffuses from bloodstream into internal organs and excretes from urine to cause transmission of leptospirosis. However, the mechanism of leptospiral invasiveness remains poorly understood. METHODS: Proteolytic activity of M16-type metallopeptidases (Lep-MP1/2/3) of L. interrogans was determined by spectrophotometry. Expression and secretion of Lep-MP1/2/3 during infection of cells were detected by quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction, Western blot assay, and confocal microscopy. Deletion and complementation mutants of the genes encoding Lep-MP1/2/3 were generated to determine the roles of Lep-MP1/2/3 in invasiveness using transwell assay and virulence in hamsters. RESULTS: Leptospira interrogans but not saprophytic Leptospira biflexa strains were detectable for Lep-MP-1/2/3-encoding genes. rLep-MP1/2/3 hydrolyzed extracellular matrix proteins, but rLep-MP1/3 displayed stronger proteolysis than rLep-MP2, with 123.179/340.136 µmol/L Km and 0.154/0.159 s-1 Kcat values. Expression, secretion and translocation of Lep-MP1/2/3 during infection of cells were increased. ΔMP1/3 but not ΔMP2 mutant presented attenuated transmigration through cell monolayers, decreased leptospiral loading in the blood, lungs, liver, kidneys, and urine, and 10/13-fold decreased 50% lethal dose and milder histopathologic injury in hamsters. CONCLUSIONS: Lep-MP1 and 3 are involved in virulence of L. interrogans in invasion into hosts and diffusion in vivo, and transmission of leptospirosis.

Leptospirose no município de Campinas, São Paulo, Brasil: 2007 a 2014 / Leptospirosis in Campinas, São Paulo, Brazil: 2007-2014

RESUMO: Objetivo: Analisar a distribuição de casos e óbitos humanos por leptospirose, segundo características sociodemográficas, epidemiológicas, clínicas, tempo de atendimento, pluviosidade e distribuição espacial em Campinas, São Paulo, no período de 2007 a 2014. Método: Estudo ecológico utilizando informações dos casos confirmados de leptospirose. Realizou-se análise descritiva dos casos, segundo variáveis selecionadas. A relação entre casos autóctones e pluviosidade foi verificada pelo coeficiente de correlação de Spearman. Georreferenciaram-se casos/óbitos por áreas classificadas segundo indicadores socioambientais. Resultados: Dos 264 casos, 76,1% eram homens e 58,4% tinham entre 20 e 49 anos. Cerca de 55% foram hospitalizados. Prevaleceu o diagnóstico clínico-laboratorial (89,4%) e a letalidade foi de 10,6%. Na área urbana, ocorreram 74,2% dos casos e, 48,9%, no domicílio. O principal fator de risco foi o local com sinal de roedores. Houve forte correlação entre a incidência de casos e a pluviosidade (p < 0,05) nos anos de 2010 a 2012. Observou-se maior concentração de casos na região centro-sudoeste. A distribuição espacial dos casos/óbitos mostrou aglomerados em regiões classificadas como de menor nível socioeconômico. Conclusão: Os padrões de ocorrência de leptospirose em Campinas, São Paulo, mostraram similaridade com outras cidades brasileiras. A identificação de áreas com maior incidência de casos/óbitos contribui para a adoção de estratégias específicas de intervenção e priorização de recursos na redução do risco de infecção e tratamento precoce dos acometidos pela doença.

ABSTRACT: Objective: to analyze the distribution of leptospirosis according to sociodemographic, epidemiologic, and clinical characteristics, assistance time, rainfall and spatial distribution in Campinas/SP in the period from 2007 to 2014. Method: This is an ecological study using information from the confirmed cases. A descriptive analysis was carried out according to the selected variables. The relationship between the cases and rainfall was verified through the Spearman's correlation coefficient. The cases/deaths were georeferenced per areas classified according to socioenvironmental deprivation indexes in Campinas. Results: From the 264 cases, 76.1% occurred in men, 58,4% in the 20 to 49 years old age range. Approximately 55% were hospitalized, with a prevalence of clinical-laboratorial diagnoses of 89.4%, and the lethality was 10.6%. The urban area concentrated 74.2% of the cases, and 48,9% occurred in the household environment. The main risk factor was evidence of the presence of rodents at the site. There was strong correlation between the incidence of cases and rainfall (p < 0.05) in 2010 to 2012. A higher concentration of the cases was observed in the Center-Southwest region. Spatial distribution of cases/deaths showed clusters in regions classified at lower socioeconomic levels. Conclusions: The patterns of occurrence of leptospirosis in Campinas showed similarity with other Brazilian municipalities. The identification of areas with higher incidence of cases/deaths contributes to the adoption of strategies for intervention and prioritization of resources aiming at the reduction of the risk of infection and at early treatment for those affected.

Environmental and socioeconomic determinants of leptospirosis incidence in Colombia / Determinantes ambientales y socioeconómicos asociados con incidentes en casos de leptospirosis en Colombia / Determinantes ambientais e socioeconômicos associados a casos incidentes de leptospirose na Colômbia

Human leptospirosis is an infection that most often affects tropical countries. Since 2007, Colombia requires the notification of disease cases, enabling the observation of an increase in cases in recent years. The objectives of this article were to analyze environmental and socioeconomic variables and to evaluate their relationship with human leptospirosis cases. This is an ecological study on human leptospirosis cases aggregated by municipality and reported between 2007 and 2016. Spatial aggregation assessment was made using the Getis-Ord Gi method, and negative binomial regression was used to evaluate the relationship between environmental and socioeconomic variables with human leptospirosis. During the study period, 9,928 cases of human leptospirosis were reported, and 58.9% of municipalities reported at least one case. Four hotspots of human leptospirosis, including 18 municipalities, were identified. The results of the negative binomial model confirmed the importance of the effects of education, poverty and some climatic variables on the decadal incidence rate of human leptospirosis. Our results confirm the importance of socioeconomic determinants such as social marginality associated with violence and education, as well as ecological variables such as rainfall, height above sea level and forest coverage on the incidence rate of human leptospirosis at municipal scale.

La leptospirosis humana es una infección que afecta a la mayoría de países tropicales. Desde 2007, la notificación de esta enfermedad es obligatoria en Colombia, reflejando un aumento de casos observado durante los últimos años. Los objetivos fueron analizar las variables ambientales y socioeconómicas y evaluar su relación con los casos de leptospirosis. Se llevó a cabo un estudio ecológico de casos de leptospirosis humana agregados por municipio, registrados entre 2007 y 2016. La evaluación de la agregación espacial fue desarrollada mediante el Getis-Ord Gi method, y se implementó una regresión negativa binomial para evaluar la relación entre las variables ambientales y socioeconómicas con la leptospirosis humana. Durante el periodo de estudio, se registraron 9.928 casos de leptospirosis humana, y un 58,9% de los municipios informaron de al menos un caso de leptospirosis. Se identificaron cuatro epicentros de leptospirosis humana, incluyendo 18 municipios. Los resultados del modelo binomial negativo confirmaron la importancia de los efectos de la educación, pobreza y algunas variables climáticas en la tasa de incidencia de leptospirosis humana por decenios. Nuestros resultados confirmaron la importancia de determinantes socioeconómicos tales como: marginalidad social, asociada con la violencia y educación, así como variables ecológicas como: precipitaciones, altura sobre el nivel del mar y superficie forestal en la tasa de incidencia de la leptospirosis humana dentro una escala municipal.

A leptospirose humana é uma infecção que majoritariamente afeta países tropicais. Desde 2007, a notificação da doença é compulsória na Colômbia, o que levou a um aumento do número de casos nos últimos anos. Os objetivos foram analisar variáveis ambientais e socioeconômicas e avaliar sua relação com casos de leptospirose humana. Foi feito um estudo ecológico de casos de leptospirose humana notificados entre 2007 e 2016 agregados por município. Uma análise de agregação espacial foi desenvolvida por meio do método Getis-Ord Gi e regressão binomial negativa foi implementada para avaliar a relação entre variáveis ambientais e socioeconômicas e leptospirose humana. Durante o período do estudo, 9.928 casos de leptospirose humana foram notificados e 58,9% de municípios notificaram ao menos um caso de leptospirose. Quatro hotspots incluindo 18 municípios foram identificados. Os resultados do modelo binomial negativo confirmaram a importância dos efeitos de educação, pobreza e algumas variáveis climáticas na taxa de incidência decenal de leptospirose humana. Nossos resultados confirmam a importância de determinantes socioeconômicos tais como marginalidade social associada a violência e educação, bem como as variáveis ecológicas, tais como precipitação, altitude acima do nível do mar e cobertura florestal sobre a incidência de leptospirose humana no nível municipal.

Leptospirose humana em Porto Alegre, Rio Grande do Sul, de 2007 a 2013: caracterização dos casos confirmados e distribuição espacial / Leptospirosis humana en Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brasil, de 2007 a 2013: caracterización de los casos confirmados y distribución espacial / Human leptospirosis in Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil, 2007-2013: characterization of confirmed cases and spatial distribution

Resumo Objetivo: caracterizar os casos confirmados de leptospirose humana residentes em Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brasil, entre 2007 e 2013, e sua distribuição espacial. Métodos: estudo descritivo dos casos registrados no Sistema de Informação de Agravos de Notificação (Sinan); foram investigados bairros e territórios de abrangência das unidades de saúde (US) com maior ocorrência de casos, utilizando-se análise espacial por meio da técnica de Kernel. Resultados: 228 casos foram confirmados no período, com incidência acumulada de 2,3 casos/100 mil habitantes; a maioria era de homens adultos (81,6%), economicamente ativos (82,5%), com baixa escolaridade (45,8%); as principais ocupações foram catador de material reciclável (15,8%) e pedreiro/servente de obras (15,2%); foram identificadas seis US prioritárias para ações de controle e prevenção da leptospirose. Conclusão: o perfil epidemiológico dos casos e sua distribuição espacial sugerem a manutenção dos fatores de risco ambientais favoráveis à ocorrência da doença nessas áreas.

Resumen Objetivo: caracterizar casos confirmados de Leptospirosis humana residentes en Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brasil, entre 2007 y 2013, y su distribución espacial. Métodos: estudio descriptivo de los casos registrados en el Sistema de Información de Agravamientos de Notificación; se investigaron barrios y territorios abarcados por las Unidades de Salud (US) con mayor incidencia de casos, utilizando el análisis espacial por medio de la técnica de Kernel. Resultados: fueron confirmados 228 casos en el período, con incidencia acumulada de 2,3 casos/100.000 habitantes; la mayoría hombres adultos (81,6%), económicamente activos (82,5%), baja escolaridad (45,8%); las principales ocupaciones fueron recicladores (15,8%) y albañiles / peones de obra (15,2%); se identificaron seis US como prioritarias para acciones en el control y prevención de la leptospirosis. Conclusión: el perfil epidemiológico de los casos y su distribución espacial indica el mantenimiento de los factores de riesgo ambiental que favorecen la aparición de la enfermedad en esas áreas.

Abstract Objective: to characterize confirmed human leptospirosis cases resident in Porto Alegre, Rio Grande do Sul, Brazil, between 2007 and 2013, and their spatial distribution. Methods: this was a descriptive study of cases registered on the Notifiable Diseases Information System; we investigated neighborhoods and areas in the catchment area of Health Units (US) with highest case occurrence, using spatial analysis as per the Kernel technique. Results: 228 cases were confirmed in the period, with cumulative incidence of 2.3 cases/100,000 inhabitants; the majority were adult males (81.6%), economically active (82.5%) and had low schooling (45.8%); the main occupations were recyclable waste collector (15.8%) and builder/builder's mate (15.2%); six priority US were identified for leptospirosis control and prevention actions. Conclusion: the epidemiological profile and spatial distribution of cases suggest that there continue to be environmental risk factors favoring human leptospirosis occurrence in these areas.

A leptospiral AAA+ chaperone-Ntn peptidase complex, HslUV, contributes to the intracellular survival of Leptospira interrogans in hosts and the transmission of leptospirosis.

Leptospirosis caused by Leptospira is a zoonotic disease of global importance but it is considered as an emerging or re-emerging infectious disease in many areas in the world. Until now, the mechanisms about pathogenesis and transmission of Leptospira remains poorly understood. As eukaryotic and prokaryotic proteins can be denatured in adverse environments and chaperone-protease/peptidase complexes degrade these harmful proteins, we speculate that infection may also cause leptospiral protein denaturation, and the HslU and HslV proteins of L. interrogans may compose a complex to degrade denatured proteins that enhances leptospiral survival in hosts. Here we show that leptospiral HslUV is an ATP-dependent chaperone-peptidase complex containing ATPase associated with various cellular activity (AAA+) and N-terminal nucleophile (Ntn) hydrolase superfamily domains, respectively, which hydrolyzed casein and chymotrypsin-like substrates, and this hydrolysis was blocked by threonine protease inhibitors. The infection of J774A.1 macrophages caused the increase of leptospiral denatured protein aggresomes, but more aggresomes accumulated in hslUV gene-deleted mutant. The abundant denatured leptospiral proteins are involved in ribosomal structure, flagellar assembly, two-component signaling systems and transmembrane transport. Compared to the wild-type strain, infection of cells in vitro with the mutant resulted in a higher number of dead leptospires, less leptospiral colony-forming units and lower growth ability, but also displayed a lower half lethal dose, attenuated histopathological injury and decreased leptospiral loading in lungs, liver, kidneys, peripheral blood and urine in hamsters. Therefore, our findings confirmed that HslUV AAA+ chaperone-Ntn peptidase complex of L. interrogans contributes to leptospiral survival in hosts and transmission of leptospirosis.

Papel de los roedores en la transmisión de Leptospira spp. en granjas porcinas / The role of rodents in the transmission of Leptospira spp. in swine farms

RESUMEN Diferentes especies de roedores son potenciales transmisores de múltiples agentes zoonóticos como Leptospira spp., espiroqueta causante de la Leptospirosis, que es una enfermedad infecciosa que tiene un impacto negativo en la porcicultura debido a que genera grandes pérdidas productivas, reproductivas y económicas. En las granjas porcinas, las especies de roedores más comunes son el ratón doméstico (Mus musculus), la rata parda (Rattus norvegicus) y la rata negra (Rattus rattus), que actúan como huéspedes de mantenimiento de diferentes serovares de Leptospira spp., contaminando con orina el ambiente, los alimentos y el agua, poniendo en riesgo la salud humana y animal. Por esta razón, el objetivo de este artículo es describir el papel de los roedores en la transmisión de Leptospira en granjas porcinas. Para esto, se realizó una búsqueda bibliográfica en diferentes bases de datos como Science Direct, Scopus, Redalyc, PubMed y SciELO. Los resultados de la revisión de literatura, demuestran que son escasos los estudios que reportan la importancia de los roedores en la transmisión de Leptospira en granjas porcinas. La presentación de la enfermedad depende en gran parte de la presencia, el contacto y el control de roedores en las granjas, aunque también se deben tener en cuenta factores ambientales, de supervivencia del agente y las medidas de higiene, entre otros.(AU)

ABSTRACT Different species of rodents are potential transmitters of multiple zoonotic agents such as Leptospira spp., a spirochete that causes leptospirosis. This is an infectious disease that has a negative impact on pig production because it generates large productive, reproductive and economic losses. In swine farms, the most common rodent species are house mice (Mus musculus), brown rats (Rattus norvegicus) and black rats (Rattus rattus), which act as maintenance hosts for different serovars of Leptospira, contaminating the environment, food and water through urine, and putting human and animal health at risk. For this reason, the objective of this article is to describe the role of rodents in the transmission of Leptospira in swine farms. For this purpose, a bibliographic search was carried out in different databases such as Science Direct, Scopus, Redalyc, PubMed and SciELO. The results of the literature review show that there are few studies that report the importance of rodents in the transmission of Leptospira in swine farms. The onset of the disease depends to a large extent on the presence, contact and control of rodents in farms, although environmental factors, agent survival and hygiene, among others, must also be considered.(AU)

Eyedrop Inoculation Causes Sublethal Leptospirosis in Mice.

Leptospirosis is potentially a fatal zoonosis acquired by contact of skin and mucosal surfaces with soil and water contaminated with infected urine. We analyzed the outcome of infection of C3H/HeJ mice with Leptospira interrogans serovar Copenhageni using an enzootic mode of transmission, the conjunctival route. Infection led to weight loss and L. interrogans dissemination from blood to urine, and spirochetes were detected in blood and urine simultaneously. The infectious dose that led to consistent dissemination to kidney after conjunctival infection was ∼108 leptospires. Interestingly, a lower number of spirochetes appeared to colonize the kidney, given that we quantified ∼105 and ∼10 leptospires per µl of urine and per µg of kidney, respectively. Leptospira-specific IgM and IgG were detected at 15 days postinfection, and isotyping of the Ig subclass showed that the total IgG response switched from an IgG1 response to an IgG3 response after infection with L. interrogans Histological periodic acid-Schiff D staining of infected kidney showed interstitial nephritis, mononuclear cell infiltrates, and reduced size of glomeruli. Quantification of proinflammatory immunomediators in kidney showed that keratinocyte-derived chemokine, macrophage inflammatory protein 2, RANTES, tumor necrosis factor alpha, gamma interferon, and interleukin-10 were upregulated in infected mice. We show that the kinetics of disease progression after infection via the ocular conjunctiva is delayed compared with infection via the standard intraperitoneal route. Differences may be related to the number of L. interrogans spirochetes that succeed in overcoming the natural defenses of the ocular conjunctiva and transit through tissue.

Seroprevalence and factors associated with Leptospira infection in an urban district of Cali, Colombia / Seroprevalencia y factores asociados a la infección por Leptospira en un distrito urbano de Cali, Colombia / Soroprevalência da infecção por Leptospira e fatores associados em um distrito urbano de Cali, Colômbia

Few studies have addressed Leptospira seroprevalence and risk factors in urban populations in Colombia. This study aimed to determine seroprevalence and factors associated with Leptospira infection in inhabitants of an urban district of Cali, Colombia. We collected sociodemographic and environmental data, as well as blood samples, from 353 subjects selected through a multistage cluster sampling design. We performed microagglutination test for the eight main Leptospira serogroups circulating in the region, considering a cut-off titer of ≥ 1:100. Most participants were female (226, 64.8%), with mean age 41.4 years, and 89 (32.6%) lived in low-low socioeconomic stratum (SES-1). Overall seroprevalence was 12.2% (95%CI: 10.3%-14.4%). Factors associated with Leptospira infection were SES 1, older age, single marital status, ethnic groups (Afro-Colombian and white/mestizo), school students, absence of toilet, barefoot walking, travel outside Cali in the previous month, and absence of skin and mucous-membrane lesions in the previous month. Our study suggests domestic and peridomiciliary transmission of Leptospira likely related to activities of daily living and inadequate environmental conditions. SES-1 is a major factor associated with Leptospira infection (adjusted OR = 4.08; 95%CI: 2.54-6.53; p < 0.001), suggesting that social and environmental conditions are key elements for endemicity of Leptospira infection in the study area. Epidemiological surveillance, improvement of environmental and sanitary conditions in various SES-1 areas, and community educational campaigns are recommended.

Pocos estudios se han centrado en la seroprevalencia por Leptospira y sus factores de riesgo en poblaciones urbanas de Colombia. Este estudio tuvo como meta determinar la seroprevalencia y los factores asociados a la infección por Leptospira en una población residente de un distrito urbano de Cali, Colombia. Recogimos datos sociodemográficos y ambientales, así como muestras de sangre, de 353 sujetos seleccionados a través de un diseño de muestreo por conglomerados en etapas múltiples. Se realizó un test de microaglutinación para los ocho serogrupos principales de Leptospira circulando en la región, considerando una zona corte de ≥ 1:100. La mayoría de los participantes fueron mujeres (226, un 64,8%), con un promedio de edad de 41,4 años, con 89 (32,6%) que vivían en condiciones socioeconómicas bajas o muy bajas (SES-1). La seroprevalencia global fue de un 12,2% (IC95%: 10,3%-14,4%). Los factores asociados con la infección por Leptospira fueron SES-1, edad más avanzada, estado civil soltera, grupo étnico (afrocolombiano y blanco/mestizo), estudiantes escolares, ausencia de baño, caminar descalzo, viajar fuera de Cali durante el mes previo al estudio, y ausencia de lesiones en la piel y membranas mucosas durante el mes previo al mismo. Nuestro estudio sugiere que la trasmisión doméstica y peridomiciliaria de la Leptospira está vinculada a actividades de la vida diaria y a condiciones ambientales inadecuadas. SES-1 es un factor importante, asociado a la infección por Leptospira (OR ajustada = 4,08; IC95%: 2,54-6,53; p < 0,001), sugiriendo que las condiciones sociales y ambientales son elementos clave para la endemicidad de la infección por Leptospira en el área de estudio. Se recomienda vigilancia epidemiológica, mejora de las condiciones ambientales y sanitarias en varias áreas SES-1, así como campañas educacionales dirigidas a la comunidad.

Poucos estudos trataram da soroprevalência para Leptospira e fatores de risco em populações urbanas da Colômbia. Este estudo teve como objetivo determinar a soroprevalência e fatores associados com a infecção por Leptospira nos habitantes de um distrito urbano de Cali, Colômbia. Os autores coletaram dados sociodemográficos e ambientais, além de amostras de sangue, de 353 indivíduos selecionados através de uma amostragem de aglomerados em múltiplas fases. Foi realizado o teste de microaglutinação para os oitos principais grupos sorológicos da Leptospira circulantes na região, considerando um título de ≥ 1:100. A maioria dos participantes era do sexo feminino (226, 64,8%), com média de idade de 41,4 anos; 89 (32,6%) pertenciam ao estrato socioeconômico mais baixo (SES-1). A soroprevalência global era 12,2% (IC95%: 10,3%-14,4%). Os fatores associados à infecção por Leptospira eram SES-1, idade, estado civil solteiro, grupo étnico (afro-colombiano e branco/mestiço), estudantes, ausência de privada no domicílio, andar descalço, viagem fora de Cali no mês anterior e ausência de lesões mucocutâneas no mês anterior. O estudo sugere a transmissão domiciliar e peridomiciliar da Leptospira, provavelmente associada a atividades cotidianas e condições ambientais adversas. SES-1 é um fator importante associado à infecção com Leptospira (OR ajustado = 4,08; IC95%: 2,54-6,53; p < 0,001), indicando que as condições sociais e ambientais são elementos importantes na endemicidade da leptospirose na área do estudo. Recomendamos a vigilância epidemiológica, melhora das condições ambientais e sanitárias em diversas áreas SES-1 e campanhas educativas comunitárias.

Rat infestation associated with environmental deficiencies in an urban slum community with high risk of leptospirosis transmission / Infestação por roedores associada a fatores ambientais numa comunidade carente com alto risco de transmissão da leptospirose / Infestación por roedores asociada a factores ambientales en una comunidad sin recursos con alto riesgo de transmisión de la leptospirosis

Abstract: We analyzed environmental factors that provide food, water and harborage to rodents and the risk of household rodent infestation in a slum community with a high risk of leptospirosis transmission. Detailed environmental surveys were performed in 221 households. Multivariate regression models evaluated the association between rodent infestation and socioeconomic status and environmental attributes obtained from Geographical Information System surveys. The general household infestation rate was 45.9%. Rattus norvegicus signs were the most prevalent, present in 74% of the infested households. The risk for rodent infestation was associated with environmental factors supporting harborage for rats, such as dilapidated fences/walls (OR: 8.95; 95%CI: 2.42-33.12) and households built on an earthen slope (OR: 4.68; 95%CI: 2.23-9.81). An increase of 1 meter from the nearest sewer was associated with a 3% (95%CI: 1%-5%) decrease in the risk of rodent infestation. A lack of sanitation where poor people live provides factors for rat infestation and could the target of educational interventions.

Resumo: O estudo analisou fatores ambientais que facilitam a presença de alimento, água e abrigo para roedores e risco de infestação por roedores numa comunidade com alto risco de transmissão da leptospirose. Foram realizados inquéritos ambientais detalhados em 221 domicílios. Modelos de regressão multivariada avaliaram a associação entre infestação por roedores e nível socioeconômico e atributos ambientais obtidos através de inquéritos com Sistemas de Informação Geográfica. O estudo mostrou uma taxa global de 45,9% de infestação domiciliar. Sinais de Rattus norvegicus eram os mais prevalentes, presentes em 74% dos domicílios infestados. O risco de infestação por roedores esteve associado a fatores ambientais que forneciam abrigo aos ratos, tais como cercas e muros dilapidados (OR: 8,95; IC95%: 2,42-33,12) e domicílios construídos diretamente sobre encostas (OR: 4,68; IC95%: 2,23-9,81). Cada incremento de um metro de distância a partir do esgoto mais próximo esteve associado a uma diminuição de 3% (IC95%: 1%-5%) no risco de infestação por roedores. A falta de saneamento básico nos locais de moradia das famílias pobres facilita a infestação por ratos e é alvo prioritário para intervenções educativas.

Resumen: El estudio analizó factores ambientales que facilitan la presencia de alimento, agua y abrigo para roedores y el riesgo de infestación por roedores en una comunidad sin recursos con alto riesgo de transmisión de la leptospirosis. Se realizaron encuestas ambientales detalladas en 221 domicilios. Los modelos de regresión multivariada evaluaron la asociación entre infestación por roedores, nivel socioeconómico y características ambientales, obtenidos a través de encuestas con Sistemas de Información Geográfica. El estudio mostró una tasa global de un 45,9% de infestación domiciliaria. Los indicios de Rattus norvegicus eran los más prevalentes, presentes en un 74% de los domicilios infestados. El riesgo de infestación por roedores estuvo asociado a factores ambientales que proporcionaban abrigo a las ratas, tales como cercas y muros derruidos (OR: 8,95; IC95%: 2,42-33,12) y domicilios construidos directamente sobre pendientes (OR: 4,68; IC95%: 2,23-9,81). Cada incremento de un metro de distancia, a partir del alcantarillado más próximo, estuvo asociado a una disminución de un 3% (IC95%: 1%-5%) en el riesgo de infestación por roedores. La falta de saneamiento básico en las viviendas de las familias pobres facilita la infestación por ratas y es el objetivo prioritario para intervenciones educativas.

O círculo vicioso da negligência da leptospirose no Brasil / The vicious circle of the leptospirosis negligence in Brazil

A leptospirose é uma das zoonoses de maior incidência mundial, estimando-se que ocorramem torno de um milhão de casos e, possivelmente, 59.000 óbitos anualmente. Foi proposto ummodelo lógico que avaliasse os aspectos que permeiam o tema, por meio de revisão narrativada literatura indexada e de manuais técnicos, que despertassem a ideia da negligência paraesta doença no Brasil. Ao fomentar uma nova abordagem paradigmática, procurou-se refletir adificuldade em se realizar um diagnóstico mais atilado e precoce, em colaboração a um processode naturalização da subnotificação pelos que organizam, gerenciam e operam o Sistema de Saúde,e que influenciam negativamente no investimento na gestão da vigilância e controle da doença nopaís, tornando-se possível a manutenção do círculo vicioso para a negligência da leptospirose noBrasil.

Leptospirosis is one of the most widespread and incident zoonosis in the world, estimated tooccur around one million cases and possibly 59,000 deaths annually. A logical model to evaluatethe aspects that permeate the theme through the narrative review of indexed literature andtechnical manuals, it was proposed to awaken the idea of the neglect of this disease in Brazil.By fostering a new paradigm approach, it was considered the difficulty in performing a moresagacious and early diagnosis. This condition contributes to a process of naturalization ofunderreporting by those who organize, manage and operate the health system. And, directlyit causes negative impact on the investment for managing the disease surveillance and controlin the country, making it possible to maintain a vicious circle for neglecting leptospirosis in Brazil.

Utilidad de las herramientas moleculares para la identificación de Leptospira spp. en muestras humanas, animales y ambientales / Usefulness of molecular tools to identify Leptospira spp. in human, animal and environmental samples

Leptospirosis es una enfermedad zoonótica endémica de potencial epidémico que afecta la salud pública y la producción pecuaria alrededor del mundo. Su agente etiológico es una espiroqueta del género Leptospira, con 20 especies reportadas hasta el momento, son las más importantes Leptospira interrogans (patógena) y Leptospirabiflexa (saprófita). Esta bacteria se transmite mediante contacto directo o indirecto en especial con orinade animales infectados, es la transmisión por medio del agua una de las más importantes. En cuanto al diagnóstico se ha evidenciado que diversas pruebas moleculares tienen una alta especificidad y sensibilidad; sin embargo, el conocimiento de la epidemiología de la leptospirosis se ha basado principalmente en estudios serológicos que han utilizado la prueba de aglutinación microscópica que presenta debilidades en sus resultados e interpretación. El objetivo del presente artículo es presentar una revisión actualizada sobre la utilidad de las herramientas moleculares para la identificación de Leptospira spp. en muestras humanas, animales y ambientales. Se llevó a cabo una búsqueda de literaturaen diferentes bases de datos como Pubmed, Science Direct, SciELO, Scopus y Redalyc.Las publicaciones encontradas fueron artículos originales y de revisión, entre otros, publicados entre 1965 y 2014. Se determinó que las herramientas moleculares permiten una identificación directa, rápida, definitivay precisa del agente etiológico, apoyan el diagnóstico, aportan al conocimiento real de laprevalencia e incidencia de la enfermedad. Las herramientas moleculares permiten la identificación de nuevas especies a partir de aislamientos obtenidos de diversas fuentes y ayudan a orientar los programas de prevención y control de esta zoonosis(AU)

Leptospirosis is an endemic and potentially epidemic zoonosis affecting public health and livestock production worldwide. Its etiological agent is a spirochaete of the genus Leptospira, with 20 species reported to date, of which Leptospira interrogans (pathogenic) and Leptospira biflexa (saprophyte) are the most important. This bacterium is transmitted by direct or indirect contact with urine from infected animals, so water is one of the major transmission ways. Regarding diagnosis, many molecular tests have been evinced to have high specificity and sensitivity; however, knowledge on the epidemiology of leptospirosis has been based mainly on serological studies using the microscopic agglutination test, which has weaknesses in its results and interpretation. The aim of this article is to present an update review on the usefulness of molecular tools in the identification of Leptospira spp. in human, animal and environmental samples. A literature search was conducted in different databases such as PubMed, ScienceDirect, SciELO, Scopus and Redalyc. The publications found were original and review articles, among others, published between 1965 and 2014. It was found that the molecular tools allow direct, quick, definitive and precise identification of the etiologic agent, support the diagnosis, and contribute to real knowledge on the disease prevalence and incidence. Molecular tools enable the identification of new species isolates obtained from various sources and help guide prevention programs and control of this zoonosis(AU)

Leptospira interrogans sorovar Copenhageni e Icterohaemorrhagiae: relação evolutiva, diferenças genéticas e associação com desfecho clínico / Leptospira interrogans serovar Copenhageni and Icterohaemorrhagiae: evolutionary relationship, genetic differences and association with clinical outcome

A leptospirose é a zoonose mais disseminada mundialmente por infectar diversas espécies diferentes de animais mamíferos. Apresenta 22 espécies identificadas, sendo dez patogênicas, cinco intermediarias e sete saprofiticas, além de apresentar mais de 250 sorovares diferentes. Em Salvador, Leptospira interrogans sorovar Copenhageni é a causadora da epidemia urbana na cidade e apresenta ratos como seu hospedeiro reservatório. As formas clínicas da leptospirose podem variar de assintomática a formas graves. As manifestações clínicas mais graves envolve o desenvolvimento da síndrome Hemorrágica pulmonar severa, e óbito do paciente. Estudos para entender as diferenças genéticas entre as diferentes espécies e sorovares é de extrema importância para identificar fatores de virulência da bactéria, genes que possam está associado aos diferentes formas clinicas, e sua capacidade de se adaptar aos diferentes ambientes. Neste trabalho foi estudado o genoma de dois importantes serovares de L. interrogans, o sorovar Copenhageni e o serovar Icterohaemorrhagiae, e suas diferenças genéticas e associação com dados clínicos e epidemiológicos. Um total de 141 isolados...

There are 22 different species of Leptospira spp. in which 10 are pathogenic, 5 intermediate and 7 saprophytic species. In Salvador the Leptospira interrogans sorovar Copenhageni is the main serovar detected, responsible for the urban epidemics, and has rats as their main host. The clinical manifestations of leptospirosis can vary from asymptomatic form to severe disease like pulmonary hemorrhagic syndrome, and death. Studies to understand de genetic differences among the species and serovars are of great importance to identify virulence factors, genes that could be related to the different clinical manifestations and its capacity to adapt in different environments. Here, the genome of two epidemiologically important serovar of the L. interrogans, the serovar Copenhageni and serovar Icterohaemorrhagiae, and their genetic differences and the association of these differences with epidemiological and clinical data were studied. A total of 141 strains...

Caracterização das leptospiras isoladas dos pacientes atendidos no Hospital Couto Maia / Characterization of isolated leptospires of patients seen in the hospital Couto Maia

A leptospirose é uma zoonose de distribuição mundial, com 1,2 milhões de casos registrados a cada ano. De 1996 a 2013, o grupo de pesquisa de leptospirose do CPqGM, realiza uma vigilância ativa no Hospital Couto Maia em Salvador-Ba, onde foi recrutado 4612 casos suspeitos para leptospirose. Destes 4612 foi confirmado o diagnóstico de 1853 (40%) utilizando pelo menos um dos três métodos de diagnóstico (MAT, Hemocultura, qPCR). Dentre os casos confirmados, 1759 (95%) foram confirmados pelo MAT. A sensibilidade do MAT foi diferente entre as amostras aguda e convalescente, sendo 60% na fase aguda e 97% na fase convalescente. O sorogrupo Icterohaemorrhagiae foi o mais prevalente (90%) dos casos confirmados para MAT. Durante o período do estudo foram coletadas 1133 hemoculturas e destas 203 (18%) foram positivas, sendo possível isolar leptospiras de 93/203 (45%) das hemoculturas, as quais foram soro-agrupadas com soros heterológos de coelho. A concordância entre o sorogrupo encontrado no MAT e na soro-agrupagem foi de 80%. Os achados mostram que existe uma concordância significante entre o sorogrupo encontrado pelos dois métodos, o que indica que o painel de cepas utilizado no MAT apresenta uma ótima cobertura para os sorogrupos prevalentes na região. A predominância de um sorogrupo facilitou quanto a tomadas de decisões para prevenção e controle, assim como facilita para o desenvolvimento de novos testes de diagnóstico e vacinas mais direcionados.

Leptospirosis is a re-emerging zoonotic disease of global importance, with 1,2 million cases reported each year. Diagnosis of leptospirosis is often difficult given the nonspecific disease presentation. In order to compare the performance of the two gold standard diagnostic tests for leptospirosis, the group enrolled 4612 patients with suspected leptospirosis during active surveillance at the state infectious disease reference hospital, Hospital Couto Maia, in Salvador, Bahia between 1996 and 2013. Of these, was confirmed Leptospira infection in 1853 (40%) using at least one of three diagnostic methods (microagglutination (MAT), blood culture, and qPCR). Was confirmed 1759 (95%) cases using only the MAT assay, and identified the serogroup Icterohaemorrhagiae as the infective agent in 90% of MAT positive samples. It was determined the sensitivity of the MAT was 60% for acute phase samples and increased to 97% for convalescent samples. Within this study period, it was possible to collect 1133 blood cultures and was isolated leptospires from 93 of 203 (45%) of blood cultures, and determined the serotype using heterologous rabbit sera. The concordance between the infective serogroup identified using hemoculture and MAT techniques was 80%. This result indicates that the panel of 11 strains used in the MAT represents a majority of the infective serogroups causing disease in our study population. The predominance of a single serogroup in symptomatic cases informs the development of new diagnostic tests and novel vaccines to prevent leptospirosis in Brazil.

Identificação de biofilme renal em ratos naturalmente infectados por Leptospira interrogans através de técnicas histoquímicas e de microscopia eletrônica de varredura, Brasil / Identification of renal biofilm in rats naturally infected with Leptospira interrogans using histochemical and scanning electron microscopy techniques, Brazil

INTRODUÇÃO: A leptospirose é um importante agravo de saúde pública e afeta ao menos um milhão de humanos por ano no mundo. Ratos de esgoto (Rattus norvegicus) são os principais reservatórios de leptospiras patogênicas nas áreas urbanas e excretam, através da urina, elevadas quantidades de bactérias diariamente. As leptospiras sobrevivem no ambiente e são transmitidas para novos hospedeiros através do contato com mucosas e pele. Leptospiras patogênicas formam densos biofilmes in vitro. A patogênese da leptospirose em reservatórios crônicos é pouco conhecida. OBJETIVO: Estudar a formação de biofilme por Leptospira interrogans em R. norvegicus capturados em uma área hiperendêmica de Salvador, Bahia, Brasil. MATERIAIS E MÉTODOS: Capturamos 86 ratos, dos quais 76 (88,4%) foram considerados portadores de L. interrogans através da avaliação por imunohistoquímica (IHQ) anti-L. interrogans e/ou Reação em Cadeia da Polimerase quantitativa em Tempo Real (RT-qPCR) utilizando iniciadores específicos para o gene lipL32. RESULTADOS: Ao exame de IHQ anti-L. interrogans, 69 ratos foram positivos. Destes, 24 (35%)...

INTRODUCTION: Leptospirosis is an important public health problem and affects at least one million people each year worldwide. Norway rats (Rattus norvegicus) are the main reservoir hosts of leptospires in urban environments. They excrete large amounts of bacteria daily. Leptospires survive in the environment and are transmitted to new hosts by contact with mucous membranes and skin. Pathogenic leptospires form dense biofilms in vitro. The pathogenesis of chronic leptospirosis in reservoirs is largely unknown. The aim of this work was to study biofilm formation by Leptospira interrogans in R. norvegicus caught in a hyperendemic area in Salvador, Bahia, Brazil. MATERIAL AND METHODS: We caught 86 rats, out of which 76 (88.4%) were carriers of L. interrogans according to immunohistochemistry (IHC) anti-L. interrogans and/or quantitative real time PCR (RT-qPCR) using LipL32 primers. RESULTS: From the 69 rats positive for IHC anti-L. interrogans, 24 (35%)...

Genotypes of pathogenic Leptospira spp isolated from rodents in Argentina

Leptospirosis is the most widespread zoonosis in the world and significant efforts have been made to determine and classify pathogenic Leptospira strains. This zoonosis is maintained in nature through chronic renal infections of carrier animals, with rodents and other small mammals serving as the most important reservoirs. Additionally, domestic animals, such as livestock and dogs, are significant sources of human infection. In this study, a multiple-locus variable-number tandem repeat analysis (MLVA) was applied to genotype 22 pathogenic Leptospira strains isolated from urban and periurban rodent populations from different regions of Argentina. Three MLVA profiles were identified in strains belonging to the species Leptospira interrogans (serovars Icterohaemorrhagiae and Canicola); one profile was observed in serovar Icterohaemorrhagiae and two MLVA profiles were observed in isolates of serovars Canicola and Portlandvere. All strains belonging to Leptospira borgpetersenii serovar Castellonis exhibited the same MLVA profile. Four different genotypes were isolated from urban populations of rodents, including both mice and rats and two different genotypes were isolated from periurban populations.

Avaliação ambiental e do gradiente social nas infecções por leptospira em uma comunidade de Salvador-Bahia / Environmental and social gradient on leptospira infection in a community assessment of Salvador-Bahia

Introdução: A leptospirose tem emergido como um importante problema de saúde pública no mundo. Esta zoonose é responsável por epidemias anuais que acometem principalmente indivíduos residentes em comunidades negligenciadas como as existentes em Salvador. Poucos estudos longitudinais foram realizados com objetivo de identificar os fatores de risco para infecção, fontes de transmissão e compreender a real dimensão da leptospirose nessas comunidades. Objetivo: Identificar fatores de risco para infecção prévia e novas infecções por leptospiras no contexto ambiental e socioeconômico em uma comunidade em Salvador Bahia. Métodos: Estudos de soroprevalência e coorte foram conduzidos na comunidade de Pau da Lima, com a realização de entrevistas domiciliares, avaliação peridomiciliar, coleta de material biológico e análises espaciais para mensurar a associação epidemiológica entre fatores de risco ambientais e as infecções. O teste de microaglutinação foi utilizado para avaliar amostras sorológicas obtidas. Resultados: Residir próximo aos esgotos abertos e do fundo do vale proximidade do domicílio a acúmulo de lixo e baixa renda foram associados com as infecções. A incidência anual de infecções secundárias foi de 2,3 vezes maior que as infecções primárias. Conclusão: O presente estudo sugere que medidas preventivas devem focalizar nas deficiências de infraestrutura que servem como fontes de transmissão. Intervenções mais efetivas precisam se concentrar especialmente nos adultos jovens e nos grupos populacionais mais desfavorecidos nestas comunidades.

Introduction: Leptospirosis has emerged as an important public health problem in the world. This zoonosis is responsible for annual epidemics affecting mainly individuals living in disadvantaged communities as existing in Salvador. Few longitudinal studies have been conducted in order to identify risk factors for infection, transmission sources and understand the real dimension of leptospirosis in these communities. Objective: To identify risk factors for early infection and new infections by Leptospira in environmental and socioeconomic context in a community in Salvador Bahia. Methods: Seroprevalence and cohort studies were conducted in Pau da Lima community, conducting home interviews peridomicilary review, collection of biological material and spatial analysis to measure the epidemiological association between environmental risk factors and infections. The agglutination test was used to evaluate serum samples obtained. Results: Residing next to open sewers and the valley floor near the homes of waste accumulation and low income were associated with infections. The annual incidence of secondary infections was 2.3 times higher than primary infections. Conclusion: This study suggests that preventive measures should focus on infrastructure deficiencies that serve as sources of transmission. More effective interventions need to focus especially on young adults and the most disadvantaged population groups in these communities.

O Papel do óxido nítrico na patogênese da leptospirose experimental em hamsters e camundongos / The role of nitric oxide in the pathogenesis of experimental leptospirosis in hamsters and mice

A patogênese da leptospirose é pouco compreendida e os estudos com. enfoque na resposta inflamatória sistêmica ou local são escassos, em especial no que se refere ao papel do óxido nítrico (NO) e da enzima óxido nítrico sintase induzível (iNOS). Dados de ensaios em culturas de células renais sugerem um papel importante da liberação de mediadores inflamatórios, tais como NO, na resposta às leptospiras e consequente nefrite intersticial. A transposição destes achados para o modelo in vivo foi pouco explorada. Por outro lado, estudos em humanos sugerem que a liberação sistêmica de NO correlaciona-se com a gravidade da doença renal e, portanto, pode ser um potencial alvo para terapia adjuvante à antibioticoterapia. O presente trabalho estudou a correlação da iNOS com distúrbios hidroeletrolíticos na patogênese da leptospirose. No modelo experimental de hamsters, avaliamos a associação da inibição dos efeitos do NO, através da terapia combinada de antibioticoterapia padrão e azul de metileno, com distúrbios eletrolíticos, alterações histopatológicas em hamsters e sobrevida. Nenhum benefício da terapia adjuvante com azul de metileno foi demonstrado. No modelo de camundongos transgênicos, investigamos o efeito da ausência do gene da iNOS na nefrite intersticial e na quantidade de bactérias observadas nos tecidos. A ausência do gene iNOS esteve associado a menor frequência de nefrite intersticial grave. Maiores estudos são necessários para investigar a função da inibição da produção de NO na patogenia da doença e da nefrite associada a leptospirose.

The pathogenesis of leptospirosis is poorly understood, and there are few studies fusing on the systemic or local inflammatory responses, especially referring to the role of nitric oxide (NO) and the enzyme inducible nitric oxide synthase (iNOS). Data from in vitro studies suggest an important role of inflammatory mediators, such as NO, in the response to leptospires in the development of interstitial nephritis. The transposition of these findings to an in vivo model was little explored. However, studies in humans suggest that systemic liberation of NO is correlated with severity of renal disease and therefore can be potential target to adjuvant therapy along with antibiotic therapy. The present work evaluated the correlation of iNOS with the pathogenesis of leptospirosis. In the experimental hamster model, we evaluated the effect of inhibiting downstream effects of NO on electrolytic disorders, histopathological changes and survival. No benefit of methylene blue treatment could be observed when compared to antibiotic (ampicillin) therapy only. In the mouse transgenic model, we investigated the effect of the absence of the Inos gene in interstitial nephritis and in the bacterial burden in target tissues. The absence of a functional iNOS gene was associated with lower frequency of severe interstitial nephritis.

Factores de riesgo sociales y ambientales relacionados con casos de leptospirosis de manejo ambulatorio y hospitalario, Turbo, Colombia / Social and environmental risk factors associated with leptospirosis of inpatient and outpatient management, Turbo, Colombia

Introducción. La leptospirosis es un problema de salud pública en el Urabá colombiano y poco se sabe sobre las condiciones ambientales y sociales de esta enfermedad en la región. Objetivo. Explorar algunos factores de riesgo relacionados con leptospirosis de manejo hospitalario y ambulatorio, en pacientes del municipio de Turbo durante los años 2010 y 2011. Materiales y métodos. Mediante un estudio descriptivo se exploraron factores relacionados con la exposición a Leptospira spp. (aspectos socio-demográficos, hábitos, condiciones físicas y de saneamiento de la vivienda, hacinamiento, fuentes de agua potable, presencia de roedores sinantrópicos y convivencia con animales) en pacientes con leptospirosis que requirieron manejo hospitalario en el municipio de Turbo durante los años 2010 y 2011. Se utilizaron medidas estadísticas estandarizadas para estudios descriptivos. Resultados. Se encontró que el hábito de caminar descalzo en ambientes domésticos representó 4,27 (1,32-13,82) veces el riesgo para presentar leptospirosis de manejo hospitalario (p=0,012). El análisis multivariado exploratorio mostró que la presencia de fauna silvestre en las viviendas puede estar relacionada también con casos de manejo hospitalario. Este hallazgo representó 4,22 (1,13-15,72) veces el riesgo comparado con los casos ambulatorios que manifestaron no tener este tipo de animales dentro de la vivienda (p=0,032). Conclusión. Este estudio plantea bases para diseñar e implementar intervenciones efectivas, orientadas desde el perfil de riesgos al que se exponen sus habitantes, en un área geográfica que exhibe una epidemiología dinámica de contexto complejo para leptospirosis.

Introduction: Leptospirosis is a public health problem in the Colombian Urabá area and little is known about the environmental and social conditions of this disease in the region. Objective: To explore some risk factors associated with leptospirosis of inpatient and outpatient management in the municipality of Turbo during the years 2010-2011. Materials and methods: A descriptive study was performed to explore factors related to Leptospira spp. exposure (socio-demographic aspects, habits, housing physical and sanitary conditions, overcrowding, drinking water sources, presence of synanthropic rodents, and living with animals) in patients with leptospirosis that required hospital management in the municipality of Turbo during the years 2010 and 2011. We used standard statistical measures for descriptive studies. Results: We found that the habit of barefoot walking in domestic environments represented 4.27 (1.32 to 13.82) times the risk for leptospirosis present in inpatient management (p=0.012). Exploratory multivariate analysis showed that the presence of wildlife in homes could also be related to cases of inpatient management. This finding represented 4.22 (1.13 to 15.72) times the risk compared with outpatient cases reported as not having this type of animals inside their home (p=0.032). Conclusion: This study suggests a basis for designing and implementing effective interventions, thought from the risk profile its inhabitants are exposed to, in a geographic area that exhibits a dynamic epidemiology of complex leptospirosis context.

Molecular serovar characterization of Leptospira isolates from animals and water in Colombia / Caracterización molecular de serovariedades de Leptospira spp. aisladas de muestras de animales y agua en Colombia

Introduction: Leptospirosis is a bacterial disease transmitted directly or indirectly from animals to humans that may result in severe hemorrhagic, hepatic/renal and pulmonary disease. There are 20 known Leptospira species and hundreds of serovars, some of which belong to different species. It is essential to identify pathogenic Leptospira serovars and their potential reservoirs to prepare adequate control strategies. Objective: To characterize the Leptospira serovars isolated from rodents, dogs, pigs and water samples in Colombia. Materials and methods: Leptospira organisms were isolated and cultured, and pathogenic strains were identified using a polymerase chain-reaction (PCR). Leptospira DNA and Salmonella Braenderup H9812 (molecular weight standard) DNA were cleaved using NotI and subjected to pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). The PFGE patterns were analyzed based on bacterial strain-typing criteria and Dice coefficients (DCs) between these isolates and over 200 Leptospira organisms isolated from other parts of the world. Results: All of the isolates were pathogenic strains, and five were genetically characterized. The P275 (84% DC) and P282 (95% DC) pig isolates were related to the Leptospira interrogans Pomona serovar; the I15 (DC: 100%) rat isolate was identical to the Leptospira interrogans Icterohameorrhagiae or Copenhageni serovars, while the C67 (64% DC) dog and A42 (60% DC) water isolates were not related (< 73.7% DC) to any of the 200 reference serovars; the closest serovars were the Leptospira noguchii Nicaragua and Orleans serovars, respectively. Conclusion: This was the first molecular characterization of Colombian Leptospira spp isolates; these isolates will be used to develop a Colombian diagnostic panel.

Introducción. La leptospirosis es una infección bacteriana transmitida directa o indirectamente de animales a humanos, la cual puede resultar en una enfermedad hemorrágica grave, hepática o renal y pulmonar. Hay 20 especies de Leptospira conocidas y cientos de serovariedades, algunas de las cuales pertenecen a diferentes especies. Es esencial identificar las serovariedades patógenas y sus reservorios potenciales para enfocar estrategias de control. Objetivo. Caracterizar las serovariedades de Leptospira aisladas de muestras de roedores, perros, cerdos y agua en Colombia. Materiales y métodos. Las cepas de leptospiras aisladas fueron identificadas como patógenas usando la reacción en cadena de la polimerasa (PRC). Sus ADN y el ADN de Salmonella Braenderup H9812 (marcador de peso molecular) fueron cortados con NotI y corridos en electroforesis de campo pulsado. Los patrones de la ECP se analizaron con base en los criterios de tipificación para cepas bacterianas y el coeficiente de Dice, cuando se compararon con 200 cepas aisladas en otras partes del mundo. Los perfiles de ADN con un coeficiente de Dice entre 73,7 % y 100 % se consideraron pertenecientes a la misma especie. Resultados. Todos los aislamientos fueron cepas patógenas y cinco se caracterizaron genéticamente. El aislamiento P275 (coeficiente de Dice: 84 %) y el P282 (coeficiente de Dice: 95 %) de cerdos, se relacionaron con Leptospira interrogans de serovariedad Pomona; el aislamiento de rata (I15) fue indistinguible de Leptospira interrogans de serovariedades Icterohaemorrhagiae o Copenhageni (coeficiente de Dice: 100 %), mientras que los aislamientos de perro (C67) y agua (A42) no se relacionaron (coeficiente de Dice <73,7 %) con ninguna de las 200 cepas de referencia; las más cercanas fueron Leptospira noguchii de serovariedades Nicaragua (coeficiente de Dice: 63 %) y Orleans (coeficiente de Dice: 60 %). Conclusiones. Esta fue la primera caracterización molecular de serotipos de aislamientos colombianos, los cuales serían los primeros miembros de un panel diagnóstico colombiano.